Uvid u molekularnu dijagnostiku i genomiku: stručna praksa studentice Leonarde Sudar u KBCO-u

14

Leonarda Sudar, studentica 3. godine prijediplomskog studija Biologija, odradila je neobaveznu stručnu praksu u KBCO na Odjelu za HLA tipizaciju i genomsku dijagnostiku pod mentorstvom nasl.doc.dr.sc. Mirjane Suver Stević.

Tijekom praktičnog dijela prakse stečeno je teorijsko iskustvo u primjeni suvremenih molekularno-dijagnostičkih metoda. Studentica je promatrala proces izolacije DNA i RNA iz uzoraka krvi pacijenata na uređajima QIAcube i Maxwell RSC te je pratila proces utvrđivanja % i tipa varijante fuzijskog prijepisa BCR::ABL1 primjenom kvantitativne i kvalitativne PCR analize u stvarnom vremenu.

​U sklopu dijagnostičkih postupaka praćen je proces fragmentarne analize kapilarnom gel elektroforezom na uređaju SeqStudio radi utvrđivanja mutacijskog statusa NPM1 i FLT3 gena kod pacijenata s akutnom mijeloičnom leukemijom. Osim toga promatran je proces genotipizacije gena CYP2C9 i CYP2C19 te određivanje genotipa za FVL, FII, MTHFR i PAI-1. Stečeno je i teorijsko znanje u molekularnoj tipizaciji HLA razreda 1 (PCR-SSP) te analizi uzoraka vanjskog provoditelja kontrole kvalitete.

Vezano za analizu uzoraka bolesnika oboljelih od kronične limfocitne leukemije, promatran je proces izolacija B limfocita metodom pozitivne selekcije s magnetskim kuglicama iz kojih je potom izolirana DNA, a teorijski je obrađena metoda sekvenciranja sljedeće generacije (NGS) radi određivanja mutacijskog statusa gena TP53, BTK, BCL-2 i PLCG2 te interpretacija rezultata i oblikovanje nalaza.